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    小而美的3D細胞培養——類器官

    發布時間: 2021-10-19  點擊次數: 2181次

    經典二維細胞培養方法,從1885年德國科學家從雞胚中分離細胞至今,解決了許多生命科學問題,但是和細胞能夠以最佳生長狀態的體內環境并不相同。近年來,為盡可能的模仿細胞在生物體內的生長環境,得到更接近類似于體內生長的細胞, 越來越多研究人員開始關注三維細胞、類器官培養技術。

    20世紀80年代左右,美國勞倫斯伯克利國家實驗室的Mina Bissell和William Ole Peterson①在乳腺癌的研究中發明了三維細胞培養技術, 他們的研究發現,以三維培養正常的乳腺上皮細胞形成了腺泡狀單層管狀結構, 同時具有原癌基因激活的乳腺上皮細胞形成了碗狀腺泡結構,而這是在2D培養時所觀察不到的現象。

    小而美的3D細胞培養——類器官

    from Dr. Reginato



    近代研究人員逐漸開始應用三維細胞培養技術,也就是把動物細胞與具有三維結構的支架材料共同培養, 使細胞能夠在三維立體空間生長、增殖和遷移, 構成三維的細胞?細胞或細胞?載體復合物, 模擬細胞在生物體內的生長環境。三維細胞培養技術也開始應用在干細胞生物學、組織工程、腫瘤學、再生醫學等研究領域。

    類器官(organoid)是體外三維培養構建出的多細胞團, 具有自我更新和自我組織能力, 并且維持了其來源組織的生理結構和功能的特點。

     類器官模型的典型制備方法,首先要分離出胚胎或多能干細胞,然后將它們培養在一個支持介質(如基質膠或水凝膠)上,使其能夠三維生長。3D類器官模型創立于二十世紀九十年代,Lindberg和Pellegrini④等將角膜緣干細胞培養在3T3滋養層細胞上,成功培養出了人源3D眼角膜結構,啟動人源細胞三維類器官培養的新領域,但是其應用仍有限! 2009年,Hans Clevers和Toshiro Sato③用源于小鼠腸道的成體干細胞培育出第一個微型腸道 (mini-guts)類器官,真正開啟類器官培養的時代。2011年,日本RIKEN發育生物學中心的研究人員,利用類器官培養將胚胎干細胞成功構建成視杯結構(optic cup)。3D類器官培養被<Science>雜志選為2013年十個大突破技術,該領域研究人員分別建構出微型大腦、肝芽以及迷你腎。

    小而美的3D細胞培養——類器官

    這些年,類器官培養技術更是廣泛運用在腫瘤生物學體外培養,研究癌癥的形成;美國紐約冷泉港實驗室腫瘤學家David Tuveson團隊,在2015年和Hans Clevers④合作共同創建結腸癌腫瘤細胞類器官;其團隊更進一步在胰腺癌患者的活體手術取得組織,建構胰腺類器官,作為抗癌藥物最佳篩選平臺。

    小而美的3D細胞培養——類器官

    J Mol Med (Berl). 2017


    2017年發表在<Nature Medicine>雜志上的一篇研究論文,來自英國劍橋大學Gurdon癌癥研究中心的生物學家 Meritxell Huch 的研究小組取得肝癌研究的重大突破。Dr. Huch和她研究團隊取下8名癌癥患者身上的腫瘤細胞,研究團隊借此創造出一種稱為「類腫瘤」約0.5毫米的迷你腫瘤(tumouroid)。劍橋癌癥研究中心的團隊也利用這種腫瘤模型測試 29 種不同的癌癥用藥,通過純化腫瘤細胞,排除正常細胞,癌癥的分析將更加容易準確。

    小而美的3D細胞培養——類器官

    Nature Medicine 2017


    在傳統的細胞培養中,大部分組織結構都會遺失改變,3D細胞培養或是類器官的培養體系,不只是在再生醫學干細胞應用,目前創建研究平臺從腎、肝、肺、腸、腦、前列腺、胰腺和視網膜等,在臨床醫學研究上都有相當大的應用,部分已運用于測試數種癌癥用藥。3D細胞培養或是類器官培養,在各個文獻中有多種不同的材料方法,小編在此分享Biozellen®3D類器官培養基質膠的成功案例給大家。

    A.形成3D腫瘤球體成功案例分享


    小而美的3D細胞培養——類器官



    B.Biozellen基質膠被溶解后分離的完整3D細胞結構照片


    小而美的3D細胞培養——類器官



    參考文獻


    1.ErbB2, but not ErbB1, reinitiates proliferation and induces luminal repopulation in epithelial acini. Muthuswamy et al., Nat. Cell Biol. 3, 785-792.

    2.ErbB2 requires integrin alpha5 for anoikis resistance via c-Src regulation of receptor activity in human mammary epithelial cells. Haenssen et al., J. of Cell Science 123, 1373-82.

    3.Stem cell-derived organoids and their application for medical research and patient treatment.Bartfeld S et al., J Mol Med, 95(7):729-738. 

    4.類器官及其在腫瘤研究中的應用( J ).李飛,高棟.中國細胞生物學學報, 2017, 39 (4): 394-400.



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